電子偏光顯微鏡像的判斷
發(fā)布人：shpuda發(fā)布時(shí)間：2014/1/17
電子偏光顯微鏡像的判斷并不簡(jiǎn)單，當電子線(xiàn)打在樣品上。
由于構成樣品的元素使電子散射，聚焦后成像，樣品具有一定厚度。其中存在的元素也較為散亂，因而引起干涉像。生物樣品多半先是用樹(shù)脂包埋，然后切片觀(guān)察。
這些步驟對真實(shí)結構不能沒(méi)有影響。例如以前是用甲基丙烯酸醋系樹(shù)脂包埋，即或不染色，在良好聚焦時(shí)也可以觀(guān)察。換成環(huán)氧樹(shù)脂包埋后，必須用電子染色方可觀(guān)察。但是用Vestopal W包埋的樣品就是不染色也可以觀(guān)察。環(huán)氧樹(shù)脂經(jīng)燒卻后灰化不染色，一般聚焦也可以觀(guān)察。下面介紹一些應該注意的問(wèn)題。
電鏡照片像與切片的關(guān)系
圖18是最常見(jiàn)的電鏡像，也是人們在判斷上容易產(chǎn)生問(wèn)題的地方，(1),(2)容易判斷，在(3),(4)的情況下正確辨認就很不容易。用樣品傾斜副件使樣品傾斜后觀(guān)察結構形態(tài)的位置，由于傾斜度的關(guān)系而呈(2), (3)的樣子?？傊?，還可以與正確的圖像近似，根據經(jīng)驗可以判斷是折斷、縱斷還是橫斷。但是，有時(shí)必須借助于傾斜副件如(4)中的有粒內質(zhì)網(wǎng)和核膜以及有窗毛細血管壁，它們的切面和原來(lái)結構不相同。
一般在電鏡像的情況下，由于此切片的厚度焦點(diǎn)深度深，在一張切片像中并不因上下焦點(diǎn)的不同而摻合在一起，而在偏光顯微鏡上用厚的超薄切片染色后即或用相差偏光顯微鏡觀(guān)察，其焦點(diǎn)也會(huì )重合或摻合，這是眾所周知的。
立體觀(guān)察
進(jìn)行立體觀(guān)察時(shí)，將樣品或照射系統左右稍微傾斜后照兩張像，印出像片，用立體鏡觀(guān)察。此種方法尤其在超高壓電鏡下，可以用較厚切片，使立體感更強。圖18中1及2的問(wèn)題如要更好地解決，有時(shí)還須借助于掃描電子偏光顯微鏡和冰凍蝕刻的技術(shù)或負染色法等。
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