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光學(xué)偏光顯微鏡的構造和使用方法

發(fā)布人:shpuda發(fā)布時(shí)間:2014/4/25

    在植物學(xué)實(shí)驗課中,經(jīng)常需要使用光學(xué)偏光顯微鏡(以下簡(jiǎn)稱(chēng)顯微鏡)觀(guān)察植物體內的各種結構。雖然大部分同學(xué)在中學(xué)已使用過(guò)顯微鏡,但有關(guān)顯微鏡的構造和正確的使用方法還沒(méi)有完全幸握。因此,在使用顯微境之前,必須認真復習并掌握顯微鏡的構造和使用方法,才能更好地發(fā)擇顯微鏡的作用,進(jìn)免發(fā)生損壞。


    偏光顯微鏡和壓破蓋玻片等事故。


    一、偏光顯微鏡的構造


    顯微鏡可分為光學(xué)系統和機械裝置兩部分(圖1一1)。

 


    (一)光學(xué)系統


    (1)物鏡:放大倍數越高越長(cháng)。接近標本,因此也叫接物鏡。物鏡安裝在鏡筒的下端。它的作用是將標本作第一次放大,然后再由目鏡將第一次放大的像作第二次放大。


    物鏡是決定偏光顯微鏡性能的最重要部件,即決定分拼力的高低,偏光顯微鏡越好,分辨力越高。


    分拼力是指分腳細微結構最小間隔的能力。人眼的分辨力為100μm,顯微鏡的分辨力以下式計算:


                          R=0.61λ/NA


    R指兩個(gè)微點(diǎn)間的距離,R越小,分辨力越高,λ為光波波長(cháng),NA為鏡口率。目前在實(shí)用范圍內物鏡的最大鏡口率為1.4.而可見(jiàn)光最短波長(cháng)為0.41.m,代入公式則:


                          R=0.61x0.4/1.4=0.17


    由此可見(jiàn),光學(xué)偏光顯微鏡的最大分辨力約為0.2μm.差不多為可見(jiàn)光最短光波的一半。


    通常物鏡分為三種:放大倍數10倍(lox)以下的叫低倍鏡;放大倍數20倍(20 x)左右的叫中倍鏡;放大倍數40-65倍(40x-65x)的叫高倍鏡。此外還有一種放大倍數為90-100倍的叫油鏡。


    在每個(gè)物鏡上除標有放大倍數外。還標有其他效值,如10倍鏡上標有10/0.25和160/0.17等。此處10為物鏡的放大倍數0.25為鏡口率,160為鏡簡(jiǎn)長(cháng)度,0.17為蓋玻片的厚度,兩者單位均為毫米(mm)。


    放大倍效低的物鏡,構造越簡(jiǎn)單,熱距越長(cháng);反之,放大倍數高的,構造越復雜,焦距越短。物銳和標本的蓋玻片上面的距離稱(chēng)為工作距離,物鏡的工作距離和物鏡的放大倍數有直接關(guān)系,放大倍數大的工作距離短,放大倍教小的工作距離長(cháng)。因此,在使用高倍鏡時(shí),由于工作距離短,要特別注意不要使物鏡直接碰到標本片,以免損壞鏡頭。

    (2)目鏡:安裝在鏡簡(jiǎn)上端,作用是把己經(jīng)被物鏡放大了的物像進(jìn)一步放大。它相當于一個(gè)放大鏡,并不增加偏光顯微鏡的分辨力,一般常用的目鏡放大倍數為4-20倍。


    (3)聚光器:載物臺中央,通光孔下方的聚光鏡和可變光附合稱(chēng)聚光器,獲光鏡相當于一組凹透鏡,可匯集來(lái)自?xún)却釾的光(或反光鏡反射的光)??勺児怅@又叫虹彩光圈,位于攝光鏡下方,由十幾片金屬薄片組成,中心部分形成圓孔,推動(dòng)虹彩光圈的把手??梢噪S愈調節圓孔的大小,選擇適當的光強。


    (4)照明器:也稱(chēng)內跪光源,通常采用高亮度、高效率的鹵素燈和非球面聚光鏡。


    (5)反光鏡:沒(méi)有照明器的偏光顯微鏡都有反光鏡,即安放在鏡住或談座上的圓形平凹雙面鍵,可作各方向轉動(dòng),對準光諫(采自然光或燈光),把光線(xiàn)反射到聚光器。平面鏡只具反光作用,凹面兼具反光和取光作用,通常光線(xiàn)較弱時(shí)使用凹面鏡,強光時(shí)用平面談。


    (二)機械裝置


    (1)鏡座:偏光顯微鏡最下方的底座,它支持顯微鏡的全部重量,并使顯微鏡能平穩放置桌面上。


    (2)鏡臂:連接鏡簡(jiǎn)和載物臺,并為移動(dòng)偏光顯微鏡時(shí)手執處。


    (3)鏡簡(jiǎn):目鏡下方的空圓簡(jiǎn)。


    (4)轉換器:位于鏡筒下方,可同時(shí)安放3-4個(gè)不同倍率的接物鏡,根據需要而轉換使用。


    (5)載物臺:連接于鏡價(jià)下端之方形或圓形平臺,用來(lái)放談玻片。中央有一通光孔,光線(xiàn)由此通過(guò)。載物臺上有推進(jìn)器,便于移動(dòng)玻片進(jìn)行觀(guān)察。


    (6)調焦裝置:鏡臂上端有大小各一對螺旋,用來(lái)升降鏡筒以調整焦距。大的為粗準焦螺旋,也稱(chēng)粗調節器螺旋,旋轉一周可升或降鏡簡(jiǎn)10mm。小的是細準焦螺旋,也稱(chēng)細調節器螺旋,旋轉一周可使鏡筒開(kāi)或降0.1mm,另一類(lèi)偏光顯微鏡是通過(guò)升降毅物臺來(lái)調焦的,故調焦螺旋在鏡臂下端。

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