相差偏光顯微鏡的明視野調節
發(fā)布人:shpuda發(fā)布時(shí)間:2014/4/24
1.將偏光顯微鏡的聚光器和接物鏡換成相差聚光器和相差物鏡,在光路上加綠色濾光片。
2.聚光器轉盤(pán)刻度“0”調節光稱(chēng)使視野亮度均勻。
3.將釀酒酵母和大腸桿菌的培養物制備水浸片,于載物臺上,用低倍物鏡(10x)在明視野下調節亮度并聚焦樣品。
相差偏光顯微鏡檢對載玻片、載玻片的要求很離。載玻片厚度應在1.0 mm左右,若過(guò)厚,環(huán)狀光闌的亮環(huán)變大,過(guò)薄則亮環(huán)變小;載玻片厚薄不均,凸凹不平,或有劃痕、塵埃等也都會(huì )影晌圖像質(zhì)量。而蓋玻片的標準厚度通常為0.16-0.17mm,過(guò)薄或過(guò)厚都會(huì )使像差、色整增加,影響觀(guān)察效果。
4.將聚光器轉盤(pán)刻度且“10”與所用10 x物鏡相匹配)。注意由明視野轉為環(huán)狀光闌時(shí),因進(jìn)光暇減少,要把聚光器的光圈開(kāi)足,以增加視野亮度。
5.取下目鏡,換上合軸調節望遠鏡。用左手指固定望遠鏡外筒一邊觀(guān)察一邊用右手轉動(dòng)其內筒,使其升降,對焦使聚光器中的亮環(huán)和物鏡中的暗環(huán)清晰;當雙環(huán)分離時(shí),說(shuō)明不合軸??捎貌吖馄鞯恼{中螺旋移動(dòng)亮環(huán),直至雙環(huán)完全重合。
6.按上法依次對其他放大倍數的物鏡和相應的環(huán)狀光附進(jìn)行合軸調節。
目鏡的合軸調節是取得良好觀(guān)察效果的關(guān)鍵。若環(huán)狀光闌的光環(huán)和相差物銳中的相位環(huán)不能精準吻合會(huì )造成光路紊亂,應被吸收的光不能吸收,該推遲相位的光波不能推遲,失去相差偏光顯微鏡的效果。
7.取下望遠鏡,換回目鏡,選用適當放大倍數的物鏡進(jìn)行觀(guān)察。
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