使用偏光顯微鏡來(lái)做微生物形態(tài)與結構的檢查
發(fā)布人：shpuda發(fā)布時(shí)間：2014/1/22
偏光顯微鏡放大法
1.普通光學(xué)偏光顯微鏡
普通光學(xué)偏光顯微鏡(light microscope)以可見(jiàn)光(日光或燈光)為光源，波長(cháng)0.4μm-0.7，平均約0.5μm,其分辨距離為光波波長(cháng)的一半，即0.25μm。0.25μm的微粒經(jīng)油鏡放大1 000倍后成0.25mm一般而言，徽生物(除絕大多數病毒外)的直徑都大于0.25μm，故可用普通光學(xué)顯微鏡予以觀(guān)察。如在光鏡上裝配暗視野聚光器，則成為暗視野顯微鏡。觀(guān)察時(shí)黑暗的背景中可看到發(fā)亮的國體，明暗反差提高了觀(guān)察效果，多用于不易染色的微生物(如螺旋體等)的形態(tài)和運動(dòng)觀(guān)察。
相差偏光顯微鏡利用相差板的光柵作用，能顯示出徽生物結構不同部位的差異?？捎糜谟^(guān)察微生物的形態(tài)、內部結構、運動(dòng)方式及繁殖過(guò)程，多用于偏光顯微鏡不易觀(guān)察的不染色標本。熒光顯微鏡也是在普通光學(xué)顯微鏡的基礎上，采用縈外光或藍紫光為光源，配合熒光抗體染色，用于細菌自體熒光觀(guān)察和熒光蔭球的觀(guān)察。
2.電子偏光顯微鏡
電子偏光顯微鏡(electron microscope, EM)是利用電子流代替可見(jiàn)光波，電磁圈代替放大透鏡而組成的偏光顯微鏡。電子波長(cháng)極短，約為。.005二。EM放大倍數可高達數十萬(wàn)倍，能分辨，run的徽拉。不僅能看清徽生物的外形.內部超徽結構也可一覽無(wú)遺。電子偏光顯微鏡顯示的圖像，可投射到熒光屏上，也可拍成照片。
當前使用的電子偏光顯微鏡有兩類(lèi)，即透射電子偏光顯微鏡(transmission electron microscope. TEM)和掃描電子偏光顯微鏡(scanning electron microscope, SEM), SEM的分辨率一般較TEM低，但可消楚地顯示物體的三維立體圖像。配合電子偏光顯微鏡觀(guān)察使用的標本制備方法有磷鎢酸或相酸筱負染色、投影法(shadowing，即以金屬?lài)娡客队?，增強對比度，使圖像具有立體感)、超薄切片(ultrathin section)及冷凍蝕刻法(freeze etching)等。冷凍蝕刻法可更演晰地顯示微生物內部的結構。電子偏光顯微鏡標本必須要放在真空干操的狀態(tài)下檢查，是不能應用于觀(guān)察活的微生物。
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