相差鏡檢法（Phase contrast PH）
在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過(guò)程中，相差鏡檢術(shù)的發(fā)明成功，是近代顯微鏡技術(shù)中的重要成就。我們知道，人眼只能區分光波的波長(cháng)（顏色）和振幅（亮度），對于無(wú)色通明的生物標本，當光線(xiàn)通過(guò)時(shí)，波長(cháng)和振幅變化不大，在明場(chǎng)觀(guān)察時(shí)很難觀(guān)察到標本.
相差顯微鏡利用被檢物體的光程之差進(jìn)行鏡檢，也就是有效地利用光的干涉現象，將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹?，即使是無(wú)色透明的物質(zhì)也可成為清晰可見(jiàn)。這大大便利了活體細胞的觀(guān)察，因此相差鏡檢法廣泛應用于倒置顯微鏡。
相差顯微鏡的基本原理是，把透過(guò)標本的可見(jiàn)光的光程差變成振幅差，從而提高了各種結構間的對比度，使各種結構變得清晰可見(jiàn)。光線(xiàn)透過(guò)標本后發(fā)生折射，偏離了原來(lái)的光路，同時(shí)被延遲了1/4λ（波長(cháng)），如果再增加或減少1/4λ，則光程差變?yōu)?/span>1/2λ，兩束光合軸后干涉加強，振幅增大或減下，提高反差。在構造上，相差顯微鏡有不同于普通光學(xué)顯微鏡兩個(gè)特殊之處：
1. 環(huán)形光闌（annular diaphragm） 位于光源與聚光器之間，作用是使透過(guò)聚光器的光線(xiàn)形成空心光錐，焦聚到標本上。
2. 相位板（annular phaseplate）在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲1/4λ。分為兩種：
1. A+相板：將直射光推遲1/4λ，兩組光波合軸后光波相加，振幅加大，標本結構比周?chē)橘|(zhì)更加變亮，形成亮反差（或稱(chēng)負反差）。
2. B+相板：將衍射光推遲1/4λ，兩組光線(xiàn)合軸后光波相減，振幅變小，形成暗反差（或稱(chēng)正反差），結構比周?chē)橘|(zhì)更加變暗
相差觀(guān)察可分為正相差和負相差
正相差：適用于物質(zhì)內部細微結構的觀(guān)察，黑背景白標本
負相差：適用于物體形態(tài)，數量及活體情況的觀(guān)察，白背景黑標本
正相差和負相差主要區別在于，物鏡后焦點(diǎn)平面上相差板鍍膜不同，所以光透過(guò)率不一樣；負相差的鏡檢效果是暗中之明，即被檢物體的合成光就比背景明亮，正相差的鏡檢效果是明中之暗，即被檢物體的合成光要比背景暗
負相差物鏡（Negative contrast）用縮寫(xiě)字母“N”表示，正相差物鏡（Positive contrast）用縮寫(xiě)字母“P”表示
四．微分干涉稱(chēng)鏡檢術(shù)（Differential interference contrast DIC）
微分干涉鏡檢術(shù)出現于60年代，它不僅能觀(guān)察無(wú)色透明的物體，而且圖象呈現出浮雕壯的立體感，并具有相襯鏡檢術(shù)所不能達到的某些優(yōu)點(diǎn)，觀(guān)察效果更為逼真。
原理；
微分干涉稱(chēng)鏡檢術(shù)是利用特制的渥拉斯頓棱鏡來(lái)分解光束。分裂出來(lái)的光束的振動(dòng)方向相互垂直且強度相等，光束分別在距離很近的兩點(diǎn)上通過(guò)被檢物體，在相位上略有差別。由于兩光束的裂距極小，而不出現重影現象，使圖象呈現出立體的三維感覺(jué)。
DIC顯微鏡的物理原理完全不同于相差顯微鏡，技術(shù)設計要復雜得多。DIC利用的是偏振光，有四個(gè)特殊的光學(xué)組件：偏振器（polarizer）、DIC棱鏡、DIC滑行器和檢偏器（analyzer）。偏振器直接裝在聚光系統的前面，使光線(xiàn)發(fā)生線(xiàn)性偏振。在聚光器中則安裝了偌瑪斯斯棱鏡，即DIC棱鏡，此棱鏡可將一束光分解成偏振方向不同的兩束光（x和y），二者成一小夾角。聚光器將兩束光調整成與顯微鏡光軸平行的方向。最初兩束光相位一致，在穿過(guò)標本相鄰的區域后，由于標本的厚度和折射率不同，引起了兩束光發(fā)生了光程差。在物鏡的后焦面處安裝了第二個(gè)偌瑪斯斯棱鏡，即DIC滑行器，它把兩束光波合并成一束。
這時(shí)兩束光的偏振面（x和y）仍然存在。最后光束穿過(guò)第二個(gè)偏振裝置，即檢偏器。在光束形成目鏡DIC影像之前，檢偏器與偏光器的方向成直角。檢偏器將兩束垂直的光波組合成具有相同偏振面的兩束光，從而使二者發(fā)生干涉。x和y波的光程差決定著(zhù)透光的多少。光程差值為0時(shí)，沒(méi)有光穿過(guò)檢偏器；光程差值等于波長(cháng)一半時(shí)，穿過(guò)的光達到最大值。于是在灰色的背景上，標本結構呈現出亮暗差。為了使影像的反差達到最佳狀態(tài)，可通過(guò)調節DIC滑行器的縱行微調來(lái)改變光程差，光程差可改變影像的亮度。調節DIC滑行器可使標本的細微結構呈現出正或負的投影形象，通常是一側亮，而另一側暗，這便造成了標本的人為三維立體感，類(lèi)似大理石上的浮雕
五.偏光顯微鏡（Polarizing microscope POL ）
偏光顯微鏡是鑒定物質(zhì)細微結構光學(xué)性質(zhì)的一種顯微鏡。凡具有雙折射的物質(zhì)，在偏光顯微鏡下就能分辨的清楚，當然這些物質(zhì)也可用染色發(fā)來(lái)進(jìn)行觀(guān)察，但有些則不可能，而必須利用偏光顯微鏡。
偏光顯微鏡的特點(diǎn)，就是將普通改變?yōu)槠膺M(jìn)行鏡檢的方法，以鑒別某一物質(zhì)是單折射（各向同行）或雙折射性（各向異性）。
六.浮雕相襯顯微鏡（RC HMC ）
1975年，Robert Hoffman 博士發(fā)明
2002年，專(zhuān)利到期，各顯微鏡廠(chǎng)家紛紛推出采用以自己名義命名的RC技術(shù)產(chǎn)品
原理
斜射光照射到標本產(chǎn)生折射、衍射，光線(xiàn)通過(guò)物鏡光密度梯度調節器產(chǎn)生不同陰影，從而使透明標本表面產(chǎn)生明暗差異，增加觀(guān)察對比度
特點(diǎn)
提高未染色標本的可見(jiàn)性和對比度；
圖象顯示陰影或近似三維結構而不會(huì )產(chǎn)生光暈；
可檢測雙折射物質(zhì)(巖石切片、水晶、骨頭) ；
可檢測玻璃,塑料等培養皿中的細胞,器官和組織；
聚光鏡的工作距離可以設計的更長(cháng)；
RC物鏡也可用于明場(chǎng),暗場(chǎng)和熒光觀(guān)察
七：熒光顯微鏡（Fluorescence
Microscopy FL）
熒光鏡檢術(shù)是用短波長(cháng)的光線(xiàn)照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體，使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(cháng)波長(cháng)的熒光，然后觀(guān)察。
優(yōu)點(diǎn)：
? 檢出能力高（放大作用）
? 對細胞的刺激?。梢曰铙w染色）
? 能進(jìn)行多重染色
用途：
? 物體構造的觀(guān)察——熒光素
? 熒光的有無(wú)、色調比較進(jìn)行物質(zhì)判別——抗體熒光等
? 發(fā)熒光量的測定對物質(zhì)定性、定量分析
